猪旋毛虫病的几种常见实验室鉴定方法效果比较

分别采用快速试纸条法、快速ELISA法、常规镜检法和人工胃液消化法4种方法对1566头屠宰猪做旋毛虫病的检测,旋毛虫检出率分别为1.66%、1.66%、1.21%和1.60%,通过对这4种方法检测效果进行比较,发现快速试纸条法具有特异、敏感、快速、简便的特点,用于现场检测可收到立等可取的效果。     

绵羊包虫病的ELISA诊断实验

在屠宰场通过肝脏观察采集健康的和疑似感染棘球蚴的绵羊血清通过ELISA试剂盒诊断,对ELISA试剂盒的准确性和敏感性进行了评估,发现越是感染后期它的敏感性越高,而在活体中对细粒棘球蚴或多头棘球蚴正确的免疫诊断却比较困难。     

牛分枝杆菌抗原MPB70、MPB83和ESAT-的融合表达及重组蛋白的初步应用

应用PCR方法从牛分枝杆菌Vallee株基因组中扩增获得mpb70、mpb83和esat-6三个目的基因片段。采用重叠延伸剪接技术（splicing by overlap extension，SOE）获得融合基因mpb70-mpb83后，将mpb70-mpb83和esat-6串连于同一表达载体pET32a（＋）中得到重组质粒pET70-83-E6。转化BL21（DE3）大肠杆菌感受态后，经IPTG诱导以可溶的形式表达融合蛋白。用Ni^2＋亲合层析的方法纯化该融合蛋白。Western blot分析显示：该融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生特异性反应，而与牛副结核病阳性血清不反应。用该纯化蛋白初步建立了间接ELISA方法，并检测了117份临床血清样本（其中67份为PPD阳性牛血清），阳性率为39．32％（46／117）份，与PPD皮试诊断的符合率为82．05％（96／117）。     

呼肠孤病毒在鸡传染性腺胃炎病例中存在情况的研究

腺胃肿大为鸡传染性腺胃炎的主要特征,我国多个地区有该病发生,本研究用ELISA双抗体夹心法检测采集于山东省青岛、枣庄、泰安等地区鸡传染性腺胃炎腺胃样品中的呼肠孤病毒抗原,结果上述地区检测阳性率分别在75%、60%、50%,表明上述地区发生的传染性腺胃炎病鸡腺胃中存在呼肠孤病毒。     

不同方法对牛舍气载魏氏梭菌型别的研究

分别采用ELISA、多重PCR方法对从一个犊牛舍分离到的魏氏梭菌进行型别研究,结果显示:ELISA检测结果为88%的菌种属于A型,3.4%为C型,8.6%是D型;而多重PCR结果均为A型。     

三种检测猪伪狂犬病抗体的方法比较

应用血清中和试验(SNT)、乳胶凝集试验(LAT)和PRVgpI抗体鉴别ELISA三种方法检测了42份猪血清中的伪狂犬病抗体效价并进行了比较。结果表明SNT与LAT二种方法的阳性符合率为87.1%(27/31),阴性符合率为90.1%(10/11),总符合率为88.1%(37/42),且SNT的敏感性高于LAT,但PRVgpI抗体与SN和LA抗体无相关性。     

李属坏死环斑病毒CP基因在大肠杆菌中的表达及其抗血清制备

本实验用RT—PCR的方法获得李属坏死环斑病毒的印基因，并将其连接到表达载体pET-22b（＋）上，得到重组质粒pET—PNRSVCP，转化大肠杆菌BL21（DE3）后，用IPTG进行诱导表达。SDSPAGE和Westernblot分析结果表明，印基因在大肠杆菌中获得了高效表达，获得的融合蛋白分子量约为29．0kDa。将该融合蛋白免疫兔子，获得PNRSV特异性抗血清。酶联法（ELISA）测定的效价为1／1024。为用血清学方法检测该病毒提供了基础条件。     

甘蔗花叶病毒HC-Pro基因原核表达及表达产物抗血清制备

采用RT-PCR方法自甘蔗花叶病毒北京玉米分离物（SCMV-BJ）的基因组中分离出其HC-Pro基因，通过T4DNA聚合酶连接到原核表达载体pET-22b（＋）上，获得的重组子pETHC转化大肠杆菌B121（DE3），用IPTG在37℃进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blot分析表明，HC-Pro基因在大肠杆菌中获得了高效表达，产生分子量约为52kDa的融合蛋白。将融合蛋白纯化后免疫兔子，获得了特异性的抗血清并提取了抗体IgG。ACP-ELISA测定抗血清的效价为1／8192。结果表明，该血清可用于SCMV-BJ的检测，并为进一步分析HC-Pro的功能奠定基础。     

ELISA和LAT检测猪血清弓形虫抗体的比较

应用弓形虫重组蛋白rMIC3为抗原建立的酶联免疫吸附试验(ELISA)和乳胶凝集试验(LAT)2种方法,平行检测来自36个猪场的471份猪血清中的抗弓形虫特异性抗体。结果显示,ELISA和LAT对母猪弓形虫抗体的阳性检出率分别为42.86%(21/49)和44.90%(22/49),2种方法的阳性检出符合率为95.45%(21/22);对育肥猪的阳性检出率分别为42.06%(135/321)和43.61%(140/321),2种方法的阳性检出符合率为93.57%(131/140);对仔猪的阳性检出率分别为29.07%(30/101)和45.54%(46/101),2种方法的阳性检出符合率为63.04%(29/46)。结果表明,ELISA和LAT可用于猪弓形虫病的诊断和血清学调查,LAT更适合于仔猪弓形虫病的检测。     

新疆猪、牛、羊弓形虫病的血清学调查

目的为摸清新疆地区家畜弓形虫感染情况。方法作者对新疆乌鲁木齐周边地区的猪、牛和阿勒泰地区的牛、羊随机抽样,采用间接血凝试验(IHA)进行了血清学调查。结果乌鲁木齐周边地区的猪的感染率为66.39%(243/336),牛为31.94%(23/72);阿勒泰地区牛为31.8%(28/88),羊为33.33%(12/36);结论弓形虫在这三种动物中均有相当高的感染率,应引起人们的足够重视,加强防范。